提升產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新能力促進產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化升級國家獸藥產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)盟致力于建立產(chǎn)業(yè)技術(shù)發(fā)展信息交流平臺，收集了解產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新過程中的需求，為聯(lián)盟成員單位提供技術(shù)、產(chǎn)品、人力資源和信息、咨詢、培訓等綜合服務；受企業(yè)委托，對科技成果的技術(shù)水平和產(chǎn)業(yè)化前景進行評估；定期舉辦獸藥行業(yè)技術(shù)創(chuàng)新論壇，加強成員單位間的信息交流，提出切實建議，凝聚產(chǎn)業(yè)共識，積極為國家政策獻言獻策，引導行業(yè)健康發(fā)展。為此，聯(lián)盟微信公眾號設立《新技術(shù)&研究進展》欄目，收集、發(fā)布獸藥產(chǎn)業(yè)相關技術(shù)創(chuàng)新及研究進展，本期介紹華中農(nóng)業(yè)大學動科動醫(yī)學院何啟蓋教授團隊發(fā)表的“TurboID Screening of the OmpP2 Protein Reveals Host Proteins Involved in Recognition and Phagocytosis of Glaesserella parasuisby iPAM Cells”。
近日，國際學術(shù)期刊Microbiology Spectrum在線發(fā)表了華中農(nóng)業(yè)大學動科動醫(yī)學院何啟蓋教授團隊題為“TurboID Screening of the OmpP2 Protein Reveals Host Proteins Involved in Recognition and Phagocytosis of Glaesserella parasuisby iPAM Cells”的研究論文。該研究通過TurboID鄰近標記技術(shù)，揭示了豬格拉瑟氏菌OmpP2蛋白與宿主細胞的互作蛋白質(zhì)組，并通過過表達和siRNA干擾技術(shù)證實宿主細胞膜蛋白CAV1、ARF6和PPP2R1A參與iPAM細胞對豬格拉瑟氏菌的識別與吞噬。該研究從宿主的角度揭示了豬格拉瑟氏菌入侵宿主細胞的關鍵蛋白，進一步闡明了豬格拉瑟病的致病機理，為治療和防控提供了新的思路。豬格拉瑟氏菌是定植于豬上呼吸道的一種常在菌，但在特定的條件下，例如豬群應激、免疫力低下或者伴隨其他病原混合感染時，該菌可以侵入機體各系統(tǒng)組織，引起以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎和腦膜炎為臨床特征的革拉瑟氏病。何啟蓋教授團隊多年來一直專注于豬格拉瑟氏菌的致病機制研究。TurboID為生物素連接酶，其在游離生物素存在的條件下，可將10nm范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)進行生物素標記，之后通過鏈霉素親和磁珠對生物素化的蛋白進行捕獲及進行質(zhì)譜鑒定，可得到與目標蛋白互作的蛋白質(zhì)組。本研究通過將豬格拉瑟氏菌外膜蛋白OmpP2與TurboID融合表達，并將重組蛋白與iPAM細胞互作，共鑒定到240個與OmpP2互作的宿主蛋白，其中包含四個膜蛋白（CAV1、ARF6、PPP2R1A和AP2M1）。利用過表達和siRNA干擾技術(shù)證明CAV1、ARF6和PPP2R1A參與iPAM細胞對豬格拉瑟氏菌的識別和吞噬。本研究表明，TurboID鄰近標記技術(shù)是研究病原菌與宿主蛋白互作的有力工具。
圖1. TurboID鄰近標記技術(shù)示意圖
圖2.質(zhì)譜鑒定結(jié)果
華中農(nóng)業(yè)大學動科動醫(yī)學院博士生江昌盛為論文第一作者，李文濤教授和何啟蓋教授為論文通訊作者。該研究得到了財政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助（CARS-35）的資助。https://journals.asm.org/doi/full/10.1128/spectrum.02307-22
編輯：周盼伊
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